Praegu on globaalne reaalBromelaini pulbertootjad asuvad peamiselt Tais ja Indoneesias. Chongqing Joywin Natural Products Co., Ltd. on ka Tais Prachuapkhirikhanis asuv toorensüümide tehas üks peamisi tootjaid. Viimastel aastatel on bromelaini kasvava turunõudluse tõttu tekkinud pakkumise nappus. Ja suur kogus India "Bromelaini" sisenes maailmaturule väga madalate hindadega. 2400 GDU Bromelaini hind on 20–60 USD/kg.
Pärast uurimist leiti, et Indias ei ole bromelaini tootvaid tehaseid. Alguses põhines India "bromelaini" aktiivsuse testimise meetod peamiselt ettevõtte standardil ja need India ettevõtted petsid katsemeetodit valemis kohandatud konversioonikoefitsiendiga, et saavutada kvalifitseeritud ensüümi aktiivsuse tuvastamine.
|
Tüüp |
India "Bromelaini" tootja Assay |
Rahvusvaheline ühisanalüüs |
Memo |
|
|
Analüüs pärineb |
India tootja GDU test |
Rahvusvaheline ühine GDU analüüs |
||
|
Sarnasused |
Substraat |
želatiin |
želatiin |
Kasutage sama substraati |
|
Ensüümi aktiivsuse määratlus |
Ühiku definitsioon (želatiini lagundamise ühik-GDU): üks ühik hüdrolüüsib želatiinist 1.0mg aminolämmastikku 20 minutiga pH 4,5 juures 45 kraadi juures. |
Ühiku definitsioon (želatiini lagundamise ühik-GDU): üks ühik hüdrolüüsib želatiinist 1.0mg aminolämmastikku 20 minutiga pH 4,5 juures 45 kraadi juures. |
GDU ensüümi aktiivsuse määratlus on sama |
|
|
Testi sammud |
Kasutage tiitrimise testiks NaOH lahust |
Kasutage tiitrimise testiks NaOH lahust |
Peamised katsemeetodid on samad |
|
|
Erinevused |
Titrandi kontsentratsioon |
0,05 mol/L NaOH titrant |
0,1 mol/L NaOH titrant |
Tavalise GDU testi NaOH tiitrimislahuse kontsentratsioon on kaks korda suurem kui India GDU testis. |
|
Tiitrimise lõpp-punkt |
Lõpp-punkt PH 7,8 |
Lõpp-punkt PH 9.0 |
Lõpp-punkti tuvastamisel erinev pH väärtus |
|
|
Valem |
|
|
Erinevad arvutusvalemid |
|
|
India test: arvutusvalemile pole selgitusi Testimisprotseduuri ja ensüümi aktiivsuse määratluse põhjal eeldame: T{{0}} Testi tiiter (ml 0,05 N NaOH) B{{0}} Tühitiiter (ml 0,05 N NaOH) ml 0.1- Ensüümi esialgne kaal (g) |
T{{0}} Testtiiter (ml 0,1 N NaOH) ml B{{0}} Tühitiiter (ml 0,1 N NaOH) ml N=Standardiseeritud NaOH normaalsus (mol/L) M=Ensüümi esialgne kaal (g) 14-Lämmastiku molekulmass; 50-Ensüümi proovi lahjendussuhe |
India tootja Assay järgi ja koos rahvusvahelise ühise GDU ensüümi aktiivsuse määratlusega peaks valemis olev number 700 olema (14 × 0,05 × 100=70), kuid nad märgivad selle väärtuseks 700. viib vale tulemuseni, mis on 10 korda suurem. |
Kuna üha rohkem kliente mõistis, et tegu on vale analüüsiga ja avastasid, et tegelik aktiivsus on vaid kümnendik tegelikust aktiivsusest, hakkasid India tootjad segama papaiini teiste ensüümidega nagu bromelain. Kuna nii papaiini kui ka bromelaini GDU kvantitatiivne tuvastamise meetod on sama, on turul olev India "bromelain" kvalifitseeritud ensüümi aktiivsusega. Kuna aga Indias toodetud papaiinil on valgu kääritamise järel haisev lõhn, kasutavad nad tavaliselt lõhna katmiseks maitse- ja lõhnaaineid. See muudab India "Bromelaini" nii fermentatsioonilõhna kui ka maitselõhnaga. Kuigi tõelisel puhtal bromelainil on ananassi varre eriline aromaatne lõhn.
Bromelaini identifitseerimine
1. SDS-PAGE analüüs
Mark: M-valgu marker, 1-bromelain (Joywin) (10 μL); 2-Bromelain (India tootja) (10 μL); 3-Bromelain (India) (10 μL); 4-Papaiin (10 μL)
Valgumarkeri ribade molekulmass ülalt alla järjestikku on:
180 Kda, 130 Kda, 100 KDa, 70 KDa, 55 KDa, 40 KDa, 35 KDa, 25 KDa, 15 KDa ja 10 KDa.
SDS-PAGE analüüsi tulemused näitavad, et bromelaini iseloomulik riba on umbes 25 kda, bromelainil on 3 peamist iseloomulikku riba, samas kui papaiinil on mitu riba vahemikus 13–30.
2. MALDI-TOF MS identifitseerimine
MALDI-TOF MS kromatogrammi järgi on bromelainil ainult üks iseloomulik piik, umbes 24,5 Kda, samas kui papaiinil on kolm iseloomulikku piiki, umbes 13,4 Kda, 23,7 Kda ja 26,7 Kda. Lisaks näitab see, et India "bromelaini" põhiolemus on papaiin.
JOYWIN2013. aastal asutatud on innovatsioonipõhine biotehnoloogiaettevõte. Tais asuv JOYWIN Bromelaini tehas kasutab kohalikke rikkalikke ressursse, et pakkuda klientidele erinevaid bromelaini toodete spetsifikatsioone. Alates 200 GDU/g kuni 2400 GDU/g. Bromelaini töökodadel, taimeproteaasi töökodadel ja ladudel on ka tipptasemel rajatised ja ranged kvaliteedikontrollisüsteemid. Ühena neljast ülemaailmsest bromelaini tootjast oleme FSSC22000, ISO9001, ISO14001, ISO22000, BRC ja Cgmp sertifikaadiga tehas. Kui soovite rohkem teada saadaBromelaini pulbervõi olete huvitatud selle ostmisest, võite meilida aadressilcontact@joywinworld.com. Vastame teile esimesel võimalusel pärast sõnumi nägemist.